上海黄海药检仪器有限公司
俄色是产于青藏高原东南缘的蔷薇科苹果属高 原植物变叶海棠（Malus toringoides (Rehd.) Hughes., ES），ES 富含黄酮类物质，具有降血糖、降血脂、 降血压、抗糖尿病并发症等多种药理学作用，可 用于治疗 2 型糖尿病。俄色总黄酮（total flavonoids from E’se, ESF）水溶性差，ESF 易在胃内被酸破坏 和被酶降解，因而导致其口服生物利用度降低。为 了提高其生物利用度，直肠给药可作为一种简便、 有效的替代途径，栓剂作为直肠给药的一种剂型， 具有避免 ESF 在胃内被酸破坏和被酶降解、避免肝 脏首过效应、提高生物利用度的特点[4]。前期研究发 现，ESF 水溶性差，ESF 易在胃内被酸破坏和酶降 解。因而导致其口服生物利用度降低。直肠给药可 避免 ESF 在胃内酸破坏和酶降解，因此选择研发 ESF 的直肠给药制剂。由于 ESF 与普通栓剂基质混溶性、 分散性不好，所制得的普通直肠给药栓剂释药性和 生物利用度不理想。因此，需先将 ESF 制备成原位 凝胶，再制备成原位凝胶中空栓剂。
而直肠给药的温敏凝胶在 36 ℃以下时呈液态， 可以自由流动，直肠给药后在体温下可立即转变成 半固体凝胶，与多皱褶的直肠黏膜组织很好的黏附。 β-环糊精包合物可将 ESF 充分分散于亲水性凝胶载 体中，凝胶可使药物滞留于病灶部位，直肠给药原 位凝胶栓剂既可以避免 ESF 在胃肠道内被破坏，同 时又避免了肝脏的首过效应。其不仅有利于提高局 部的药物浓度，同时还可达到缓慢释放药物的目的， 提高 ESF 的生物利用度。本研究将 ESF 制备成新型 原位凝胶中空栓剂，并对其的质量控制方法进行研究。
材料与方法
药品与试剂 俄色总黄酮（ESF）对照品[西南民族大学少数 民族药物研究所，批号 20130508，经核磁和质谱鉴 定，采用高效液相色谱法（HPLC）检测峰面积归一 化法计算含量，纯度大于 98%]；β-环糊精（β-CD， 山东新大生物科技有限公司）；3-羟丙基-β-环糊精 （3-HP-β-CD，山东新大生物科技有限公司）；三甲 基-β-环糊精（TM-β-CD，山东新大生物科技有限公 司）；色谱甲醇（迪马科技有限公司）；羟丙基甲基 纤维素（HPMC）（河北燕兴化工有限公司）；泊洛沙 姆 188[BASF（China）company Ltd.，批号 20150127]； 泊洛沙姆 407[BASF（China）company Ltd.，批号 20141125]；磷酸二氢钾（成都市科龙化工试剂厂）； 氢氧化钠（成都市科龙化工试剂厂）；人工胰蛋白酶 （成都倍斯特试剂有限公司）；盐酸（成都市科龙化 工试剂厂）；混合脂肪酸甘油酯（成都泸天化科森有 限责任公司，医药级/36 型）；纯化水，其他试剂试 药为分析纯。
实验仪器 D/max-2500 /PC 型转靶 X 衍射仪（日本理学公 司）；Pyris Ⅰ型差热扫描量热仪（美国 PE 公司）； Waters 2695 型液相色谱仪；UV-2450 紫外分光光度 计（日本岛津公司）；热重分析仪，TGA/SDTA851e° （瑞士梅特勒公司）；METTLER TOLEDO AL104 分 析天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司]； METTLER TOLEDO TYPE AE240S 电子分析天平 [梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司]；DF-101S 集热式恒温加热磁力搅拌器（上海广英仪器有限公 司）；FD-1 冷冻干燥机（北京博医康实验仪器有限 公司）。
方法 采用课题组前期研制的 ESF-β-环糊精包合物原 位凝胶为中间体原料并进行 ESF 原位凝胶中空栓剂 的制备，并对其的质量控制方法进行研究。
处方筛选
栓剂基质筛选 分别采用 PEG 和混合脂肪 酸甘油酯制作栓剂，在直肠温度（37 ℃）下，观察 两种基质所制栓剂的熔融状态以及原位凝胶的释放 情况。在直肠温度下，PEG 制作的栓剂不能较快熔 融，释放出原位凝胶，而混合脂肪酸甘油酯则能够 较快熔融，释放出 ESF 原位凝胶。因此，本研究选 用混合脂肪酸甘油酯 36 型作为基质，制备中空栓剂。
最佳注入量筛选 考察 ESF 原位凝胶注入 量为 0.8 ml、1 ml、1.2 ml 时对熔融基质封尾、ESF 含量的影响，选择最佳凝胶注入量。当凝胶注入量 为 0.8 ml 时，栓剂空腔尚有较多的空间，封尾用的 熔融基质偏厚，影响冷却，且会使得每颗栓剂的主 药含量仅有 64 mg，含量偏低。当凝胶注入量为 1 ml 时栓剂空腔剩余空间适中，封尾用的熔融基质厚度 适中，刮削时也不会导致封尾部分脱落。然而当凝 胶注入量为 1.2 ml 时，封尾用的熔融基质较薄，刮 削时很容易脱落，不易封尾。故本实验 ESF 原位凝 胶的注入量为 1 ml。
制备工艺筛选
工艺方法筛选 分别采用两种制备工艺，一 种是倒转模具，使栓剂中间未凝固基质流出，形成 中空；一种是先将不锈钢刚管插入到模具正中间， 不挨到模具，从边缘注入基质，基质冷凝后，拔出 钢管形成中空腔。倒转法形成空腔不光滑，且由于 同一批栓剂注入时间有差异，倒转后形成的空腔也 不一致，影响空腔的大小，会对凝胶的加入量产生 影响。如果采用插管法，则形成的空腔内壁光滑， 且每个栓剂的空腔大小一致，相比倒转法每个栓剂 的差异要小的多。本实验采用插管法来形成空腔。
注模温度筛选 在 40 ℃、50 ℃、60 ℃、 70 ℃这 4 个温度条件下制备的栓剂，对栓剂外观， 基质熔融时间进行考察，选择合适的注模温度。40 ℃ 和 50 ℃时，制备出的栓剂顶端不凹陷，栓剂外表光 滑，由于脱模，但 40 ℃时半合成脂肪栓甘油酯熔融 时间较长，不利于生产；60 ℃、70 ℃时，半合成 脂肪栓甘油酯熔融较快，但顶部易形成凹陷，脱模 时容易崩裂。所以本实验选取 50 ℃为注模温度。
质量控制
性状 本品常温下外观为白色栓剂，切开后 为黄色澄清透明液体。
鉴别 称取 3 粒 ESF 原位凝胶中空栓，纵 切开，加入适量的水超声，过滤，取滤液分别加乙 醇适量，超声，作为供试品溶液。称取 ESF 标准品， 以乙醇为溶剂配制成 1 mg/ml 的溶液作为标准品溶 液。按处方比例上述方法，用去除药物的空白原位 凝胶栓，作为阴性样品溶液。按照薄层色谱法（《中 华人民共和国药典》2015 版四部，通则 0502）试验， 分别吸取上述溶液适量，点于同一 GF254 硅胶薄层 板上，以三氯甲烷-甲醇（7∶1.5）为展开剂，展开， 取出，晾干，置紫外光灯（254 nm）下检视。
粒度检查 取适量的 ESF 原位凝胶供试品， 置于载玻片上，涂成薄膜，薄层面积相当于盖玻片面 积，共涂 3 片，参照《中华人民共和国药典》2015 版， 通则 0982 第一法：粒度和粒度分布测定法测定。
重量差异检查 依据栓剂制剂通则（《中华 人民共和国药典》2015 版，通则 0107）检查，取 ESF 原位凝胶中空栓 10 个，精密称量总重量，求得平均 粒重后，再分别精密称定每粒的重量，比较每粒与 平均粒重。
融变时限 参照《中华人民共和国药典》 2015 版，通则 0922，对本品进行融变时限检查。
pH 值测定 取 ESF 原位凝胶适量，依法测 定（《中华人民共和国药典》2015 版，通则 0631） 对其 pH 值进行测定
可以采用上海黄海药检生产的融变仪RBY-N模拟在规定条件下的融化、软化或溶散的情况。
