上海黄海药检仪器有限公司
六合丹为四川大学华西医院的院内外用制剂，主要用于治疗急性胰腺炎、静脉炎、嵌顿痔水肿、腮腺炎等。临床外敷用于治疗急性胰腺炎疼痛和腹部积液时，可显著缓解患者的疼痛和加快腹腔积液的吸收及肿胀的消除，具有较高的临床价值。对于六合丹的研究多见于临床方面，而六合丹为四川大学华西医院的院内外用制剂，主要用于治疗急性胰腺炎、静脉炎、嵌顿痔水肿、腮腺炎等。临床外敷用于治疗急性胰腺炎疼痛和腹部积液时，可显著缓解患者的疼痛和加快腹腔积液的吸收及肿胀的消除，具有较高的临床价值。对于六合丹的研究多见于临床方面，而体外透皮吸收方面则未见相关报道。六合丹的组方中含有大黄、黄柏等八种中药材，黄柏中的主要成分盐酸小檗碱( BH) 可抑制 NF － κB 炎性反应通路，减少炎症因子的过度表达，对胰腺起到保护作用，并通过阻滞钙离子通道，缓解腹部疼痛; 而大黄中的主成分大黄酸( Rhe) 具有抗菌消炎，减少胰酶分泌、保护胰腺等活性。故选用六合丹中主要指标成分 BH、Rhe 进行体外透皮实验。现采用 Franz 扩散池法研究体外透皮吸收，并测定六合丹制剂透皮接受液中 BH、Rhe 的含量，同时研究不同透皮材料对六合丹的体外透皮吸收性，并从乳猪的实验参数中推测六合丹在人皮肤上的透皮性，可为人体对六合丹中有效指标成分的吸收提供参考。
实验部分
仪器、试药与动物 TPY-2智能透皮实验仪( 上海黄海药检仪器有限公司) ; LC-60 高效液相色谱仪( 日本岛津) 。六合丹 (四川大学华西医院，川药制字:Z20080187) ; 盐酸小檗碱对照品 ( BH，中国食品药品检定研究院，批号: 110713- 200208，纯度:98． 1% ) ; 大黄酸对照品( Rhe，中国药品生物制品检定所，批号: 0757-9804，纯度: 98% ) ; 甲醇、乙腈为色谱纯; 其余试剂为分析纯。♂昆明小鼠，( 20 + 2 g) 、♂乳猪( 10 kg) ( 成都达硕实验动物有限公司，许可证号分别为: SYXK 川 2014 － 189、SCXK 川 2015-030) 。
含量测定的方法
色谱条件 采用 TSKgel ODS-100V 色谱柱( 250 mm × 4.6 mm，5 μm) ，BH 和 Rhe 分别以乙腈- 0． 1% 磷酸溶液( 55∶45) ( 每 100 m L 加0. 1 g 十二烷基磺酸钠) 、甲醇 － 0． 1% 磷酸溶液( 85∶15) 为流动相，柱温 25 ℃，检测波长分别为265、254 nm，进样量 20 μL。BH、Rhe 的保留时间与对照品一致，分别约为 9. 5、7. 5 min，各色谱峰能达到较好的分离，纯度亦符合要求。
溶液的制备 精密称取适量 BH 对照品，精密称定，加流动相制成 0． 098 mg·m L－ 1BH 对照品溶液; 精密称取适量 Rhe 对照品，加甲醇制成39． 45 μg·m L－ 1大黄酸对照品溶液。采用 Franz扩散池法，选用立式改良的 Franz 透皮扩散池( 有效渗透面积为 1． 13 cm2，体积为 15 m L) 。实验时，将涂药后的皮肤固定于扩散池的给药室与接受池之间，真皮一侧与接收液( 30% 乙醇生理盐水) 紧密接触，排尽气泡，将其置于智能透皮吸收仪中，先保温平衡 10 min，再开磁力搅拌器( 300r·min-1) ，保持恒速恒温( 37 ± 1℃) ，于透皮 24 h时取 1 m L 样品溶液，用 0.45 μm 微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。
专属性的考察 以透皮实验结束后的接收液为供试品溶液，记录供试品、对照品、阴性对照品溶液的色谱图，接收液中各物质对于制剂中两种成分的含量测定无干扰，对照品和供试品的峰型良好。
TPY-2型药物透皮扩散试验仪，是我公司与药物制剂国家工程研究中心联合研制、开发的新产品。主机见面采用中文菜单液晶屏显示，操作简单、方便。具备打印、优盘储存功能。该仪器可使用直立式扩散池及卧式扩散池，在干式恒温容器箱内，磁力均匀搅拌的工作状态下，通过动物皮缓慢渗透，客观地再现了药物在溶剂中渗透的速度和程度的药理过程，在工作容器中也可注水，用户在做立式杯子时可用，也可干式使用。目前是国内检测方法之一。该仪器箱体夹层采用六面注入导热液体,外层抽去空气,确保一定的真空度,使仪器的各项指标更加稳定可靠。磁力搅拌，噪音小速度均匀；控温精度极高；外形美观大方，是制药行业、化妆品行业检验透皮扩散的最佳检测仪器。
